Liofilizarea, cunoscută și sub denumirea de uscare prin congelare, este un procedeu utilizat pentru conservarea materialului biologic prin îndepărtarea apă din eșantion, care implică mai întâi înghețarea eșantionului și apoi uscarea, sub vid, la temperaturi foarte scăzute Temperaturile. Probele liofilizate pot fi depozitate mult mai mult decât probele netratate.
De ce se folosește liofilizarea?
Liofilizare sau uscarea prin congelare a culturilor bacteriene, stabilizează culturile pentru păstrare pe termen lung, reducând în același timp daunele care pot fi cauzate de uscarea strictă a probei. Multe microorganisme supraviețuiesc bine când liofilizează și pot fi rehidratate și cultivate cu ușurință în mediile de cultură, după perioade îndelungate de depozitare.
Liofilizarea este folosită și în biotehnologie și industrii biomedicale pentru conservarea vaccinurilor, probelor de sânge, proteine purificateși alte materiale biologice.
Această scurtă procedură de laborator poate fi folosită cu orice uscător de congelare disponibil în comerț pentru a vă păstra colecția de cultură.
Procesul
Procesul de liofilizare este de fapt o aplicare a unui fenomen fizic numit sublimare: trecerea unei substanțe de la solid la o stare gazoasă, fără a trece mai întâi prin lichid fază. În timpul liofilizării, apa din proba congelată este îndepărtată sub formă de vapori de apă, fără să se dezghețe mai întâi proba.
Greșeli comune
Una dintre cele mai frecvente greșeli atunci când vine vorba de liofilizare este să nu știi punctul de topire al eșantionului, ceea ce face dificilă alegerea liofilizatorului corect. Probele dvs. se pot topi în timpul procesului. O altă greșeală obișnuită este că gândirea mai rece este mai bună atunci când uscarea prin congelare pe un uscător de tip raft. În timpul uscării primare, ar trebui să setați temperatura raftului la valoarea sub temperatura eutectică a eșantionului. Ar trebui să existe doar suficientă căldură pentru a încuraja moleculele eșantionului să se miște - dar să prevină topirea.
A treia greșeală este folosirea echipamentului greșit pentru eșantioanele dvs. Deoarece uscătoarele de congelare sunt utilizate într-o setare de grup, ar trebui să știți următoarele înainte de a cumpăra unul:
- Câtă umezeală va fi liofilizată
- Care este eșantionul (și temperatura eutectică)
- Cum să folosiți corect uscătorul de congelare
Dacă unitatea nu este utilizată corect, ar putea strica toate probele. Ceea ce ne aduce la o altă greșeală comună: Nu menținerea pompei de vid. Pompa trebuie să fie în stare excelentă de funcționare pentru ca liofilizarea să funcționeze. Rularea pompei cu balastul de gaz deschis cu 30 de minute înainte și după procesul de uscare prin congelare va crește durata de viață a pompei. Deschiderea balastului de gaz curăță contaminanții din pompă pentru a preveni deteriorarea componentelor interne. Ar trebui să verificați adesea uleiul de pompă pentru decolorare și particule și să schimbați uleiul după cum este necesar. Schimbările regulate de ulei mențin pompa trăgând la vid optim în timpul procesului de uscare prin congelare.
În cele din urmă, faptul că accesoriile greșite de uscare pentru congelare pentru procesul de liofilizare pot fi, de asemenea, o mare greșeală. Ai nevoie de o probă de dop sub vid? Apoi, este necesară o cameră de oprire. Uscați congelarea în flacoane? Apoi, asigurați-vă că aveți o cameră de uscare cu orificii.
Prin evitarea greșelilor de mai sus, puteți oferi o mai bună îngrijire pentru uscătorul și pompa dvs. de congelare și puteți avea mostre mai bune atunci când se face uscarea prin congelare.
Referințe
Știri Labconco "Top 5 greșeli făcute în procesul de liofilizare."