Utilizările siRNA în cercetarea geneticii moleculare

siRNA, care reprezintă un acid ribonucleic interferic mic, este o clasă de molecule de ARN dublu-catenare. Este uneori cunoscut sub denumirea de ARN cu interferențe scurte sau ARN-ul de reducere la tăcere.

ARN-urile interferice mici (siRNA) sunt bucăți mici de ARN cu catenă dublă (ds), de obicei aproximativ 21 de nucleotide cu lungime de 3 '(pronunțată cu trei prime) nucleotide) la fiecare capăt care poate fi folosit pentru a „interfera” cu traducerea proteinelor prin legarea la și promovarea degradării ARN-ului mesager (ARNm) la specific secvențe.

Funcția siRNA

Înainte de a vă scufunda în ce este exact siRNA (nu trebuie confundat cu Mirna), este important să cunoaștem funcția ARN-urilor. Acidul ribonucleic (ARN) este un acid nucleic prezent în toate celulele vii și acționează ca un mesager care poartă instrucțiuni de la ADN pentru controlul sintezei proteine.

La virusuri, ARN și ADN pot transporta informații.

Procedând astfel, siRNA-urile împiedică producerea de proteine ​​specifice pe baza secvențelor de nucleotide ale ARNm-ului lor corespunzător. Procesul se numește interferență ARN (RNAi) și mai poate fi menționat ca silențiere siRNA sau knockdown siRNA.

instagram viewer

De unde vin

SiRNA este considerat, în general, provenind din catene mai lungi de creștere exogenă sau provenind din afara unui organism (ARN, care este preluat de celulă și este supus prelucrării ulterioare).

ARN provine adesea de la vectori, cum ar fi virusuri sau transpozoni (o genă care poate schimba pozițiile în cadrul unui genom). S-a descoperit că acestea joacă un rol în apărarea antivirală, degradarea mARN-ului sau mARN-ului supraprodus pentru care s-a avortat traducerea sau prevenirii perturbării ADN-ului genomic de către transpozoni.

Fiecare catena siRNA are o grupare fosfat 5 '(cinci primi) și o grupare 3' hidroxil (OH). Sunt produse din ARN cu buclă de ARN sau buclă de păr care, după intrarea într-o celulă, este divizată de o enzimă asemănătoare cu RNază III, numită Dicer, folosind RNase sau enzime de restricție.

SiRNA este apoi încorporat într-un complex proteic multi-subunitate numit complex de reducere a liniilor induse de RNAi (RISC). RISC „caută” un ARNm țintă adecvat, în care siRNA se desface apoi și, se crede, antisensul catena direcționează degradarea catenei complementare a ARNm, folosind o combinație de endo- și exonuclează enzime.

Utilizări medicale și terapeutice

Atunci când o celulă mamiferă se confruntă cu un ARN cu două catenă, cum ar fi un siRNA, poate greși ca un produs secundar viral și să inițieze un răspuns imun. În plus, introducerea unui siRNA poate provoca dezinteresarea neintenționată acolo unde alte proteine ​​care nu amenință pot fi atacate și eliminate.

Introducerea de prea mult siRNA în corp poate duce la evenimente nespecifice datorită răspunsului imun înnăscut activare, dar având în vedere capacitatea de a bate orice genă de interes, ARNm-urile au potențial pentru mulți utilizări terapeutice.

Multe boli pot fi tratate potențial prin inhibarea expresiei genice, prin modificarea chimică a siRNA-urilor pentru îmbunătățirea proprietăților lor terapeutice. Unele proprietăți care ar putea fi îmbunătățite sunt:

  • Activitate îmbunătățită
  • Stabilitate serică crescută și mai puține obiective
  • Scăderea activării imunologice

Prin urmare, proiectarea siRNA sintetic pentru utilizări terapeutice a devenit un obiectiv popular al multor companii biofarmaceutice.

O bază de date detaliată a tuturor acestor modificări chimice este tratată manual la siRNAmod, o bază de date curată manuală de siRNA-uri modificate chimic validate experimental.